Kalibrasi Spektrofotometer UV/VIS

Tujuan kalibrasi

  • Agar alat spektrofotometer dapat digunakan dengan baik (menghasilkan data yang handal dan valid) dan awet
  • Untuk mengetahui letak kesalahan atau kerusakan secara dini sehingga dapat diperbaiki sebelum alat mengalami kerusakan berat
  • Sesuat persyaratan ISO/IEC 17025 (klausal 5.5)

Kalibrasi

  1. Panjang gelombang (presisi – akurasi)
  2. Absorban (presisi – akurasi)
  3. Sinar sesatan

Verifikasi (unjuk kerja) alat : pengecekan secara rutin

1. Panjang gelombang (presisi – akurasi)

Ada tiga metode kalibrasi λ

  1. a.   Lampu lucutan bertekanan rendah (Hg; Cd atau Zn)

Tabel 1. Garis emisi lampu Hg, Cd dan Zn

Unsur

λ(nm)

Unsur

λ(nm)

Hg

185,0

Hg

435,8

Zn

213,9

Cd

467,8

Cd

228,8

Cd

480,0

Hg

253,7

Hg

546,1

Hg

365,0

Hg

579,1

Hg

404,7

Cd

643,8

  1. b.   Gelas filter Holmium atau Didimium

Tabel 2. Data λmaks terseleksi dari Holmium dan Didimium

Filter Holmium

λmaks (nm)

Filter Didimium

λmaks (nm)

241,5 ± 0,2

573 ± 3,0

279,4 ± 0,3

586 ± 3,0

287,5 ± 0,4

685 ± 4,5

333,7 ± 0,6

360,9 ± 0,8

418,4 ± 1,1

453,2 ± 1,4

536,2 ± 2,3

637,5 ± 3,8

  1. c.   Larutan Halmium oksida dalam HClO4

Tabel 3. Panjang Gelombang Maks Larutan Holmium Oksida

Panjang Gelombang Maks Larutan Holmium Oksida (nm)
241,1 ± 0,1
278,2 ± 0,5
287,2 ± 0,2
361,2 ± 0,2

 

Pengecekan panjang gelombang

1)  Keterulangan panjang gelombang / wavelength repeatability

Adalah ukuran kemampuan suatu spektrofotometer untuk kembali pada posisi spektral yang sama yang ditentukan berdasarkan pita absorpsi dari suatu pita (band) dari panjang gelombang yang telah diketahui bila alat di reset atau dibaca pada panjang gelombang yang telah ditentukan.

2)  Akurasi panjang gelombang / wavelength accuracy

Adalah besarnya penyimpangan (bias) dari rata-rata pembacaan panjang gelombang pada suatu pita (band) absorpsi dari panjang gelombang yang telah ditentukan.

2. Absorban (presisi – akurasi)

Kalibrasi absorbansi

  • Konsentrasi analit yang mengabsorpsi berbanding lurus dengan absorbansi yang terukur
  • Linearitas skala fotometrik harus diperiksa
  • Stabilitas pembacaan fotometrik harus cukup baik sehingga variansi selama pengukuran tidak berpengaruh pada ketelitian

Bahan yang dapat digunakan untuk kalibrasi absorban sbb

–          Larutan dikromat

Larutan K2Cr2O7 dalam 0,005 M H2SO4 (direkomendasikan untuk daerah UV)

Tabel 4. Harga absorban K2Cr2O7 dalam 0,005 M H2SO4

λ(nm) Larutan A Larutan B
235 (Min) 0,626 ± 0,009 1,251 ± 0,018
257 (Maks) 0,727 ± 0,007 1,454 ± 0,014
313 (Min) 0,244 ± 0,004 0,488 ± 0,008
350 (Maks) 0,536 ± 0,005 1,071 ± 0,010

Kalibrasi absorban dilakukan pada suhu : 20 – 30 oC

–          Asam kromat

–          Tembaga sulfat

Larutan CuSO4 dalam H2SO4 1 % (direkomendasikan untuk daerah Vis)

Tabel 5. Nilai absorbansi larutan CuSO4 dalam H2SO4 1%

Panjang Gelombang (nm) Absorbansi

600

0,068

650

0,224

700

0,527

750

0,817

Catatan :

  • Pengukuran dilakukan dengan kuvet 10 mm
  • Lebar pita (bandwidths) lebih kecil dari 10 nm
  • Penyimpangan absorban maksimum 2 %

3. Sinar sesatan

Untuk mengetahui unjuk kerja sinar sesatan dianjurkan menggunakan metoda ASTM dengan cara :

Pada 220 nm: ukur transmitansi dari 10 g/L NaI dengan kuvet 1 cm à %T < 10-10

Pada 340 nm: ukur transmitansi dari 50 g/L NaNO3 dengan kuvet 1 cm à %T = ?

Tabel 5.

Ring spectral (nm) Filter cairan Panjang sel (mm)
165 – 173,5 Air 0,10
170 – 183,5 Air 10,0
175 – 200 KCl encer (12 g/L) 10,0
195 – 223 NaBr encer (10 g/L) 10,0
210 – 259 NaCl encer (10 g/L) 10,0
250 – 320 Aseton 10,0
300 – 385 NaNO3 encer (50 g/L) 10,0

Daftar Pustaka

Modul Kursus“Pengecekan Kalibrasi Antara dan Verifikasi Peralatan Dalam Laboratorium Pengujian Sesuai Dengan SNI ISO/IEC 17025;2008” RCChem Learning Centre Bandung 7-11 Nopember 2011

Tinggalkan Balasan

Isikan data di bawah atau klik salah satu ikon untuk log in:

Logo WordPress.com

You are commenting using your WordPress.com account. Logout / Ubah )

Gambar Twitter

You are commenting using your Twitter account. Logout / Ubah )

Foto Facebook

You are commenting using your Facebook account. Logout / Ubah )

Foto Google+

You are commenting using your Google+ account. Logout / Ubah )

Connecting to %s